食蟹猴PD模型-产品标准

MPTP诱导食蟹猴PD模型产品标准规范

1 帕金森病的概念

帕金森病：Parkinson’s disease，PD；又名震颤麻痹（paralysis ghititans），是一种发生老年人群的神经退行性疾病，病程较长，可持续数年或数十年。临床症状包括运动症状和非运动症状：（1）运动症状主要有静止性政策、运动迟缓、姿势异常、肌强直；（2）非运动症状主要包括便秘、嗅觉障碍、睡眠障碍、自主神经功能障碍及精神、认知障碍等。PD患者病理呈现中脑黑质多巴胺（dopamine, DA）能神经元的变性死亡、纹状体DA含量显著性减少以及黑质残存神经元胞质内出现路易小体（Lewy body）。

2 MPTP诱导帕金森病的机制

MPTP是一种神经毒素，可以通过血脑屏障进入大脑组织，代谢形成有毒物质 MPP+ ；MPP+ 由多巴胺转运体转运至胞内，与线粒体复合物I结合，损伤氧化呼吸链，选择性损伤多巴胺能神经元。当动物接收MPTP注射后，MPP+会在大脑中聚集，并损伤多巴胺能神经元，导致多巴胺水平下降，从而引起帕金森病的各种症状。

3 模型构建流程

4 成模时间

（1）不需要静脉追加的动物，16周可成模；

（2）需静脉追加MPTP的动物，18-22周成模。

5 成模标准

5.1 行为学评分

据《非人灵长类动物帕金森病模型临床评分量表》（kurlan，et al. 1991）进行行为学评分，见附录A；注射MPTP后动物的PPD评分大于10分，且稳定维持12周。


不需静脉追加 MPTP	需静脉追加 MPTP

图1：注射MPTP后动物的行为学评分。（1）未静脉追加MPTP的猴子在颈内注射MPTP后PD评分在4-18周维持稳定且分值大于10分。（2）静脉追加的MPTP猴子在第4周时PD分值小于10分，第5周进行静脉追加MPTP，追加MPTP后动物的PD分值增加，在第10-22周维持稳定且分值大于10分。

5.2 左旋多巴胺干预试验

通过给予动物左旋多巴胺，根据动物行为学评分和运动量分析评估PD模型猴对左旋多胺的反应，验证MPTP诱导的PD模型是否造成多巴胺能神经元的损伤。给予左旋多巴胺后动物的PD评分应明显降低，运动量应明显增加。

图2：左旋多巴胺干预PD模型猴的PD评分和运动变化。（1）左旋多巴胺干预后，PD模型猴的行为学评分分值明显低于干预前的行为学评分。（2）左旋多巴胺干预后，PD模型猴的需动量明显高于干预前的运动量。

附录A

（规范性）

非人灵长类动物帕金森疾病模型评分量表 (Kurlan,etal.,1991)
1. 面部表情	分数
正常（老年恒河猴常表现中度表情的减少）	0
轻度但能注意到面部表情的减少	1
中度表情的减少	2
重度，面具脸	3
2. 静止性震颤（左/右）	分数
无	0
轻度：较小的幅度，间断发生	1
中度更为明显和持久	2
重度，较大幅度，持久	3
3.动作或意向性震颤	分数
无	0
轻度或间断性出现（左/右）	1
中度，较为明显和持久	2
重度，较大幅度，持久	3
4.姿势	分数
正常	0
较轻的屈曲体态	1
明显的屈曲体态	2
5. 步态	分数
正常，四肢运动自如	0
行走缓慢、困难	1
明显的障碍，但可很慢且很费力地行走	2
行走能力严重降低，基本不能行走	3
6. 运动徐缓（全身）	分数
正常的速度，活动灵巧	0
运动轻度减慢	1
运动中度减慢	2
运动速度减慢，迟缓、费力、动作始动和维持较为困难	3
基本不能运动（运动不能）	4
7. 平衡/协调	分数
正常平衡	0
轻度，在起身和运动时平衡正常，但需靠缓慢移动或用手臂协助缓冲	1
中度，在起身或/和运动时平衡动能减低	2
平衡功能频繁和明显减低	3
8. 总体运动技巧（上肢）（左/右）	分数
正常，大范围地运动或活动	0
可注意得到的上肢应用的减低	1
上肢应用能力严重降低，较少使用	2
不能或拒绝使用上肢	3
9. 总体运动技巧（下肢）（左/右）	分数
正常，大范围地运动或活动	0
可注意得到的下肢应用的减低，但能始终不犹豫地使用	1
下肢应用能力严重降低，应用时伴明显的停顿和犹豫	2
拒绝使用下肢	3
10.防御反应	分数
正常，对检查者反应正常（后退/张嘴和示齿等）	0
可发觉地损害，防御反应减退或异常	1
给予适当的刺激时有较少的反应或没有反应	2