02
2024
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08
食蟹猴PD模型-产品标准
MPTP诱导食蟹猴PD模型产品标准规范
1 帕金森病的概念
帕金森病:Parkinson’s disease,PD;又名震颤麻痹(paralysis ghititans),是一种发生老年人群的神经退行性疾病,病程较长,可持续数年或数十年。临床症状包括运动症状和非运动症状:(1)运动症状主要有静止性政策、运动迟缓、姿势异常、肌强直;(2)非运动症状主要包括便秘、嗅觉障碍、睡眠障碍、自主神经功能障碍及精神、认知障碍等。PD患者病理呈现中脑黑质多巴胺(dopamine, DA)能神经元的变性死亡、纹状体DA含量显著性减少以及黑质残存神经元胞质内出现路易小体(Lewy body)。
2 MPTP诱导帕金森病的机制
MPTP是一种神经毒素,可以通过血脑屏障进入大脑组织,代谢形成有毒物质 MPP+ ;MPP+ 由多巴胺转运体转运至胞内,与线粒体复合物I结合,损伤氧化呼吸链,选择性损伤多巴胺能神经元。当动物接收MPTP注射后,MPP+会在大脑中聚集,并损伤多巴胺能神经元,导致多巴胺水平下降,从而引起帕金森病的各种症状。
3 模型构建流程
4 成模时间
(1)不需要静脉追加的动物,16周可成模;
(2)需静脉追加MPTP的动物,18-22周成模。
5 成模标准
5.1 行为学评分
据《非人灵长类动物帕金森病模型临床评分量表》(kurlan,et al. 1991)进行行为学评分,见附录A;注射MPTP后动物的PPD评分大于10分,且稳定维持12周。
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不需静脉追加 MPTP | 需静脉追加 MPTP |
图1:注射MPTP后动物的行为学评分。(1)未静脉追加MPTP的猴子在颈内注射MPTP后PD评分在4-18周维持稳定且分值大于10分。(2)静脉追加的MPTP猴子在第4周时PD分值小于10分,第5周进行静脉追加MPTP,追加MPTP后动物的PD分值增加,在第10-22周维持稳定且分值大于10分。
5.2 左旋多巴胺干预试验
通过给予动物左旋多巴胺,根据动物行为学评分和运动量分析评估PD模型猴对左旋多胺的反应,验证MPTP诱导的PD模型是否造成多巴胺能神经元的损伤。给予左旋多巴胺后动物的PD评分应明显降低,运动量应明显增加。
图2:左旋多巴胺干预PD模型猴的PD评分和运动变化。(1)左旋多巴胺干预后,PD模型猴的行为学评分分值明显低于干预前的行为学评分。(2)左旋多巴胺干预后,PD模型猴的需动量明显高于干预前的运动量。
附录A
(规范性)
非人灵长类动物帕金森疾病模型评分量表 (Kurlan,etal.,1991) |
|
1. 面部表情 |
分数 |
正常(老年恒河猴常表现中度表情的减少) |
0 |
轻度但能注意到面部表情的减少 |
1 |
中度表情的减少 |
2 |
重度,面具脸 |
3 |
2. 静止性震颤(左/右) |
分数 |
无 |
0 |
轻度:较小的幅度,间断发生 |
1 |
中度更为明显和持久 |
2 |
重度,较大幅度,持久 |
3 |
3.动作或意向性震颤 |
分数 |
无 |
0 |
轻度或间断性出现(左/右) |
1 |
中度,较为明显和持久 |
2 |
重度,较大幅度,持久 |
3 |
4.姿势 |
分数 |
正常 |
0 |
较轻的屈曲体态 |
1 |
明显的屈曲体态 |
2 |
5. 步态 |
分数 |
正常,四肢运动自如 |
0 |
行走缓慢、困难 |
1 |
明显的障碍,但可很慢且很费力地行走 |
2 |
行走能力严重降低,基本不能行走 |
3 |
6. 运动徐缓(全身) |
分数 |
正常的速度,活动灵巧 |
0 |
运动轻度减慢 |
1 |
运动中度减慢 |
2 |
运动速度减慢,迟缓、费力、动作始动和维持较为困难 |
3 |
基本不能运动(运动不能) |
4 |
7. 平衡/协调 |
分数 |
正常平衡 |
0 |
轻度,在起身和运动时平衡正常,但需靠缓慢移动或用手臂协助缓冲 |
1 |
中度,在起身或/和运动时平衡动能减低 |
2 |
平衡功能频繁和明显减低 |
3 |
8. 总体运动技巧(上肢)(左/右) |
分数 |
正常,大范围地运动或活动 |
0 |
可注意得到的上肢应用的减低 |
1 |
上肢应用能力严重降低,较少使用 |
2 |
不能或拒绝使用上肢 |
3 |
9. 总体运动技巧(下肢)(左/右) |
分数 |
正常,大范围地运动或活动 |
0 |
可注意得到的下肢应用的减低,但能始终不犹豫地使用 |
1 |
下肢应用能力严重降低,应用时伴明显的停顿和犹豫 |
2 |
拒绝使用下肢 |
3 |
10.防御反应 |
分数 |
正常,对检查者反应正常(后退/张嘴和示齿等) |
0 |
可发觉地损害,防御反应减退或异常 |
1 |
给予适当的刺激时有较少的反应或没有反应 |
2 |