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研发服务

分子生物学实验
• CRISPR/Cas9技术
简单来讲,CRISPR/Cas9是一种分子生物学技术,通过这种技术科研人员可以对细胞和生物体内的基因进行编辑。所谓的基因编辑就是通过某种生物手段和技术,对生物体内的遗传物质进行修改。基于原核生物的获得性免疫系统研发出的CRISPR/Cas9技术只包含两种重要的成分,一种是行使DNA双链切割功能的Cas9蛋白,而另一种则是具有导向功能的sgRNA(single guide RNA)。当细胞内同时表达sgRNA和Cas9蛋白时,Cas9蛋白通过与sgRNA结合,靶向到目的DNA序列上发挥DNA双链切割的功能。DNA序列被切割产生断裂后,引发细胞内部的DNA修复机制(DNA repair)。真核细胞同时存在着同源重组修复和非同源重组修复。在同源重组修复下,断裂的染色体以另一条完整的姐妹染色单体为模板进行DNA修复,而在非同源重组修复下,断裂出的DNA随机修复,引入新的碱基,使基因产生移码突变。


• ELISA 检测
酶联免疫吸附实验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。
• 核酸提取
核酸提取是分子生物学的基本组成部分,高质量的核酸在分子生物学上的应用至关重要。核酸提取为大量广泛研究和应用提供了答案(例如:克隆、qRT-PCR和全基因组、转录组范畴中的二代测序技术),获得的核酸可以在分析基础研究和疾病研究中的基因表达、跟踪对药物治疗的反应、识别新物种并深入了解进化过程、诊断疾病等方面以不同方式进行应用。


• 质粒提取
质粒多为一些双链、环状的DNA分子,是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作,进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。
• CHIP 检测
核酸和蛋白质是组成生命的主要生物大分子,两者的相互作用是构成生命活动的生长、繁殖、运动、遗传和代谢等生命活动的基础。研究蛋白质和核酸间的相互作用是人们探索生命现象奥秘的关键,CHIP检测实验是应用于蛋白与核酸互作关系的重要参考。


• co-ip检测
Co-IP主要用于检测蛋白质与蛋白质之间相互作用,是IP实验的一种扩展,基于IP反应的潜力,在样品溶液中捕获和纯化主要目标(抗原等)及通过天然相互作用与靶标结合的其他的大分子。此外,还可以利用Co-IP来确定在不同条件下的蛋白质相互作用。
• 免疫印迹(Western blot)检测
蛋白质免疫印迹法(WesternBlot),简称WB,是指通过SDS-PAGE胶将不同分子量的蛋白质分离开,然后将目标蛋白转移到载体(PVDF)膜上,利用抗原抗体的特异性结合,用特异性的一抗结合目标蛋白,用HRP标记的二抗结合一抗,再加以ECL发光液显色,检测组织或者细胞内某种或者某些特异性蛋白质的表达。蛋白质免疫印迹是做蛋白质分析的一种常规技术,常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析,还可以用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。WB技术现已广泛应用于蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个研究领域。检测组织或者细胞内某种或者某些特异性蛋白质的表达。蛋白质免疫印迹是做蛋白质分析的一种常规技术,常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析,还可以用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。

• 流式细胞技术
流式细胞技术(flowcytometry,FCM)是利用流式细胞仪进行的一种单细胞定量分析和分选技术。流式细胞术是单克隆抗体及免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高度发展及综合利用的高技术产物。


• 荧光定量PCR
荧光定量PCR是检测生物样品中RNA含量的最普遍的方法,通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。目前主要使用Sybrgreen和taqman法对RNA含量进行检测。
• DNA甲基化检测
DNA甲基化是基因表达调控的一种重要机制,DNA甲基化检测是指利用各种方法对肿瘤细胞DNA甲基化程度进行测定。在恶性肿瘤的发展中,甲基化的状态并不是一成不变,肿瘤细胞内全基因组的低甲基化程度与疾病进展、肿瘤大小和恶性程度都有密切的关系,DNA甲基化检测对肿瘤恶性程度的判断有重要意义。
